高效液相色譜是有機(jī)分析，特別是藥物分析的重要手段。而色譜峰峰形影響著化合物的定量和定性。在影響色譜峰峰形的諸多因素中，“溶劑效應(yīng)”經(jīng)常被忽視。色譜級(jí)石油醚彪仕奇對(duì)高效液相色譜中“溶劑效應(yīng)”的漫談。
高效液相色譜已經(jīng)廣泛應(yīng)用于有機(jī)分析，特別是藥物分析工作中。分析工作者通常將更多精力集中在流動(dòng)相和儀器方法的選擇上，忽視了溶解樣品所用溶劑的重要性。高效液相色譜進(jìn)樣之前，必須選擇一種合適的溶劑溶解樣品。如果溶劑選擇不當(dāng)則會(huì)產(chǎn)生“溶劑效應(yīng)”，使分析工作者在定性和定量分析中產(chǎn)生誤判，影響分析結(jié)果。因此，了解“溶劑效應(yīng)”產(chǎn)生的原因及掌握避免“溶劑效應(yīng)”的基本方法對(duì)分析工作者是十分必要的。 溶劑效應(yīng)的概念溶劑效應(yīng)亦稱“溶劑化作用”。指液相反應(yīng)中，溶劑的物理和化學(xué)性質(zhì)影響反應(yīng)平衡和反應(yīng)速度的效應(yīng)。可能造成色譜峰展寬、分叉、保留時(shí)間漂移、峰面積變化，雙峰等現(xiàn)象。與此同時(shí)，較早洗脫的峰出現(xiàn)前沿或分叉，較晚洗脫的峰峰形正常溶劑效應(yīng)產(chǎn)生的原因樣品進(jìn)入高效液相色譜中，當(dāng)溶劑與流動(dòng)相存在差異時(shí)，一部分樣品溶解進(jìn)入了流動(dòng)相，一部分還留在溶劑里,造成色譜保留的差異。 在反相色譜系統(tǒng)中溶劑強(qiáng)度的順序?yàn)樗ㄗ钊酰技状迹家译妫家掖迹妓臍溥秽急迹级燃淄椋ㄗ顝?qiáng)）。溶解樣品的溶劑強(qiáng)度大于該樣品出峰時(shí)流動(dòng)相強(qiáng)度，樣品溶劑可以看成流動(dòng)相的一部分，一部分樣品溶解于溶劑中會(huì)被迅速洗脫出色譜柱，而一部分樣品溶解于流動(dòng)相，被流動(dòng)相洗脫出，這樣會(huì)造成色譜峰的展寬或者分叉。 進(jìn)樣體積造成的溶劑效應(yīng)是一般與溶劑種類有關(guān)的。流動(dòng)相作為溶劑時(shí)，增加進(jìn)樣體積后，目標(biāo)分析物色譜峰不會(huì)發(fā)生遷移，保留時(shí)間基本穩(wěn)定。使用強(qiáng)度大于該樣品出峰時(shí)流動(dòng)相強(qiáng)度的溶劑，增加進(jìn)樣體積后，目標(biāo)分析物色譜峰會(huì)向前遷移，直至裂分，并且峰高變小峰寬變大。這是因?yàn)檫M(jìn)樣體積較小時(shí)，擴(kuò)散至流動(dòng)相的目標(biāo)分析物占絕大多數(shù)，除了保留時(shí)間略微提前，峰形以及峰寬與流動(dòng)相溶解時(shí)基本一致。體積增大到一定程度，擴(kuò)散至流動(dòng)相氛圍的目標(biāo)物與留在溶劑氛圍的目標(biāo)物在數(shù)量上相當(dāng)時(shí)，色譜峰分叉明顯。當(dāng)樣品體積進(jìn)一步增大，絕大多數(shù)目標(biāo)物進(jìn)入色譜柱時(shí)是溶解在溶劑中的，目標(biāo)分析物的色譜峰已經(jīng)明顯向前遷移了。 其實(shí)在色譜柱中的流動(dòng)相只有50%是動(dòng)態(tài)，其余50%在死體積、載體間隙處于靜止?fàn)顟B(tài)。溶質(zhì)被固定相吸附先通過50%的“靜止區(qū)”，若溶劑及流動(dòng)相不兼容，則影響溶質(zhì)在溶劑與流動(dòng)相之間的傳遞，從而影響被固定相吸附而導(dǎo)致峰形變差。 以上是色譜級(jí)石油醚彪仕奇結(jié)合相關(guān)資料總結(jié)的高效液相色譜使用中“溶劑效應(yīng)”相關(guān)觀點(diǎn)，未盡全面。不足之處還請(qǐng)諒解！
