乙腈是一種常見的有機(jī)溶劑。在反相液相色譜分析中，乙腈－水與甲醇－水作用相似，常作為流動相來使用。顯然，乙腈與甲醇類似是一種極性溶劑。一般認(rèn)為乙腈可在任意條件下與水混溶。
很多所謂的定論，隨著科學(xué)研究的深入，人們的認(rèn)識也會日臻完善。濟(jì)南色譜級二氯甲烷彪仕奇列舉了能導(dǎo)致乙腈－水均相溶液發(fā)生相分離的實驗條件，及其相關(guān)的4種萃取方法乙腈鹽析萃取法、乙腈糖析萃取法、乙腈低溫萃取法和溶劑誘導(dǎo)相變萃取法等。
乙腈與水不互溶的幾種情況
鹽與乙腈－水體系
在乙腈和水構(gòu)成的均勻透明溶液中，加入適量的無機(jī)鹽或有機(jī)鹽，就會看到乙腈與水之間的相分離現(xiàn)象。由于乙腈的密度比水的密度小，因此上相為富乙腈相（含少量水），下相為貧乙腈相（主要為水）。這種由鹽誘導(dǎo)的乙腈相分離現(xiàn)象被稱為乙腈的鹽析現(xiàn)象。鹽的加入產(chǎn)生強(qiáng)烈的水化作用，鹽束縛了更多的水分子，使本來能與乙腈相互作用的自由水分子數(shù)目顯著下降，從而產(chǎn)生相分離現(xiàn)象。通過這樣的辦法可以將本來溶解在水相中的物質(zhì)在相分離過程中而被萃取到富乙腈相中，這樣的萃取方法被稱作乙腈鹽析萃取法。作為相分離引發(fā)劑的鹽主要有：氯化鈉、氯化鈣、硫酸鋅、硫酸銨、硫酸鎂、高氯酸四丁基銨等，鹽的種類會影響萃取回收率。需要指出的是，能夠在鹽的誘導(dǎo)下在原本與水互溶的溶液中產(chǎn)生相分離的有機(jī)溶劑，不單單局限于乙腈，像乙醇、異丙醇、丙酮等也都有這樣的性質(zhì)。不過由于乙腈作為樣品的基質(zhì)可與后面的反相液相色譜分析的乙腈基流動相能很好匹配，所以乙腈鹽析萃取法特別受到人們的青睞。
糖與乙腈－水體系
2008年美國伊利諾伊大學(xué)的Wang 報道了一種由糖所引發(fā)的乙腈－水間的相分離現(xiàn)象。當(dāng)向乙腈－水溶液中添加超過一定閾值的單糖（葡萄糖、木糖、阿拉伯糖或果糖）或二糖（蔗糖或麥芽糖）后，就會看到明顯的相分離現(xiàn)象。多糖不具備這樣的引發(fā)相分離的性質(zhì)。其他常用與水混溶的有機(jī)溶劑（例如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、丙酮）均不具備這樣的被糖引發(fā)而與水間存在相分離的性質(zhì)。相分離后的上相為富乙腈相，下相為貧乙腈相。基于此現(xiàn)象的萃取方法被稱為乙腈糖析萃取法。
低溫與乙腈－水體系
1999 年Yoshida和他的同事報道了一種低溫引發(fā)的乙腈與水相分離的現(xiàn)象。當(dāng)乙腈與水形成的溶液（體積比：1:1 ）放置在-20的環(huán)境中達(dá)20min，就會觀察到乙腈與水的相分離。基于這種現(xiàn)象而產(chǎn)生的萃取方法被稱為乙腈低溫萃取法。一般控制發(fā)生相分離的溫度為-40°Ｃ到-40°Ｃ ,因為乙腈的熔點為-45°Ｃ，在實驗溫度范圍內(nèi)富乙腈相為液相，而富水相多為固相。實驗證實，大部分常見的在室溫下與水混溶的有機(jī)溶劑都不具備在低溫條件下與水發(fā)生相分離的能力。與其他2種乙腈基萃取方法相比，乙腈低溫萃取法不需要引入第三方相引發(fā)試劑， 所以體系相對簡單，不會對后續(xù)的分離分析工作造成污染。另外低溫萃取也避免了較高溫度所造成的溫度敏感性分子的化學(xué)變化，使分析結(jié)果更可靠。
疏水溶劑與乙腈－水體
在均相的乙腈－水體系中添加一種疏水且與乙腈互溶的有機(jī)溶劑（如氯仿、二氯甲烷、甲苯）能誘導(dǎo)乙腈－水體系相分離，基于此的萃取方法被稱為溶劑誘導(dǎo)相變萃取。
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